Analisa Kualitatif dan Kuantitatif karbohidrat & protein.pdf | Acid | Amine

Analisa Kualitatif dan Kuantitatif Biomolekul

Metoda analisa kualitatif karbohidrat • Tes molisch ƒ ƒ ƒ ƒ

Ethanol is highly flammable.  1‐Naphthol: Eye, skin and respiratory irritant. Causing liver damage.  Conc. sulfuric acid is highly toxic. Conc. sulfuric acid is highly toxic.  Test solution: 2 g 1‐naphthol dissolved in 20 mL EtOH 96% (MOLISCH  REAGENT) 

Reaksi •

•

the presence of conc. H2SO4 sugars are dehydrated forming furfuryl derivates.  Furfural is derived from the dehydration of pentoses and pentosans, while 5‐ hydroxymethyl furfural is produced from hexoses and hexosans (1). 

Hydroxymethylfurfural is attacked by 1‐naphthol, whose hydroxyl group has a  strong electron donating resonance effect which increases the electron density in  the benzene ring. 1‐naphthol acts as a nucleophile and is added to the positive  polarized carbon of the aldehyde group of 5‐hydroxymethyl furfural. After an  intramolecular proton migration water is eliminated and a C‐C double bond is  formed (2). 

•

Now a further nucleophilic addition of 1‐naphthol molecule takes place. After an  intramolecular proton migration two protons are eliminated leading to a purple furfuryl dipheylmethane dye (3). 

Identifikasi gula pereduksi

•

The name “reducing” is given because hemiacetals (and to a lesser extent  g g hemiketals) can reduce anoxidizingg agent such as Benedict’s reagent.

DISAKARIDA

• Polysaccharides, such as amylose or amylopectin, do have a  hemiacetal group on one of their terminal ends, but  group on one of their terminal ends but practically they are nonreducing substances because there  is only one reducing group for every 2,000–10,000  monosaccharidic units. units

Beberapa p tes ggula p pereduksi • Tes fehling • Tes Benedict • Tes Barfoed • Tes osazon

Metoda analisa kuantitatif karbohidrat • • • • •

Metode kromtografi/elektroforesis Metode kimia Metode d enzimatik i ik Metode fisika Immunoassay 

Metoda analisa kualititatif protein

• if a protein molecule has a net positive charge  (at low pH or acidic condition) or a net (at low pH or acidic condition) or a net  negative charge (at high pH or basic  ), y condition), its solubility in water is increased.

Beberapa p metode • The biuret e b u et test. test. This is one of the most general  s s o e o t e ost ge e a tests for proteins. When a protein reacts with  copper(II) sulfate, a positive test is the formation  of a copper complex which has a violet color. f l h hh l l

• The ninhydrin test. Amino acids with a free  ‐NH2 group and proteins containing free amino groups  d t i t i i f i react with ninhydrin to give a purple‐blue  complex. p

• The xanthoprotein test. This is a characteristic reaction of  proteins that contain phenyl rings proteins that contain phenyl rings.  • Concentrated nitric acid reacts with the phenyl ring to give  a yellow‐colored aromatic nitro compound. Addition of  alkali at this point will deepen the color to orange alkali at this point will deepen the color to orange.